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腸道病毒通用型(EV)熒光PCR法檢測(cè)試劑盒的檢驗(yàn)原理

更新時(shí)間:2025-03-13點(diǎn)擊次數(shù):756
手足口病是由腸道病毒引起的一種常見(jiàn)的兒童疾病,大多數(shù)引起發(fā)熱,在口腔、手掌、腳掌上出現(xiàn)水皮疹。   少數(shù)可出現(xiàn)腦膜炎、腦炎、神經(jīng)源性肺水腫和心肌炎等癥狀,甚至死亡。引起手足口病的腸道病毒包括柯薩奇病毒,新型腸道病毒和埃可病毒,實(shí)驗(yàn)室診斷方法目前主要有-病毒分離、核酸檢測(cè)等。
腸道病毒通用型(EV)熒光PCR法檢測(cè)試劑盒適用于檢測(cè)標(biāo)本中的腸道病毒RNA,適用于腸道病毒感染的輔助診斷及流行病學(xué)調(diào)查,其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。
本試劑盒利用一步法反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)技術(shù),針對(duì)腸道病毒設(shè)計(jì)特異性引物和Taqman熒光探針,對(duì)腸道病毒RNA進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),用于科研實(shí)驗(yàn)中對(duì)可疑感染病料的病原學(xué)檢測(cè)。
標(biāo)本采集:
上呼吸道感染癥狀(發(fā)熱、噴、流涕、咳等):用采樣拭子蘸取鼻腔或咽部分泌物,放入無(wú)菌采樣管中(含0.4ml滅菌生理鹽水)
糞便:用采樣拭子蘸取糞便或腹瀉物置入菌采樣管中(含0.4ml滅菌生理鹽水)
保存和運(yùn)輸:
采集或處理好的樣品在2℃~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)24h;若需長(zhǎng)期保存,應(yīng)放置-70℃以下保存,凍融不超過(guò)3次。
注意事項(xiàng):
1.所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行;
2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,完-全混勻并短暫離心;
3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存;
4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;
5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;
6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;
7.實(shí)驗(yàn)完畢后用10%次氯酸或75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;
8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。
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